4D-DIA蛋白质组
4D-DIA 蛋白质组学是基于 timsTOF Pro 离子淌度平台的新一代 DIA 技术,通过捕集离子淌度(TIMS) 与同步累积连续碎裂(PASEF)扫描模式进行差异定量蛋白质组学分析。核心原理是在三个维度分离基础 上(即保留时间 retention time、质荷比 m/z、离子强度 intensity),增加了新一维度即离子淌度(ion mobility)的分离,并加持全扫描 DIA 技术,从而有效降低质谱图谱的复杂度,极大提升质谱的鉴定能力。 (如下示意图)
4D蛋白质组学的特征之一是新增的双TIMS(Trapped Ion Mobility Spectrometry,捕获离子淌度),主要是根据分子的形状和截面进行分离,能够区分m/z一致的共洗脱多肽,从而产生唯一性的质谱二级谱图,许多在3D条件下中被掩盖的低丰度蛋白信号能够被快速高效区分和识别出来,极大提高检测灵敏度(图2)。 此外,timsTOF Pro质谱仪具备其独有的平行累积连续碎裂PASEF(Parallel Accumulation Serial Fragmentation)扫描模式。母离子选择与TIMS中离子的释放同步进行,扫描速度高达100Hz,可对低丰度的母离子进行智能叠加选择,可以实现近乎100%的离子利用率,并且带来扫描速度革命性的提升。
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